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蛋白水平檢測&互作驗證
更新時間:2022-07-07 15:53:24    點擊:81次

一、蛋白免疫印跡檢測服務(Western blot)


二、免疫共沉淀檢測服務(Co-IP)

在非變性條件下裂解細胞,蛋白質之間的相互作用還可以保持。在細胞裂解液中加入抗興趣蛋白的抗體,孵育后再加入與抗體特異結合的結合于Agarose微珠上的金黃色葡萄球菌蛋白A(SPA),若細胞中有與興趣蛋白結合的目的蛋白,就可以形成這樣的一種復合物:目的蛋白-興趣蛋白-抗興趣蛋白抗體-SPA/Agarose,因為SPA/Agarose比較大,這樣復合物在離心時就被分離出來。經蛋白上樣緩沖液變性煮沸,復合物四組分又被分開。然后經WB試驗,用抗體檢測目的蛋白是什么,是否為預測蛋白。這種方法得到的目的蛋白是在細胞內天然與興趣蛋白結合的,符合體內實際情況,得到的蛋白可信度高。

三、pull  down檢測服務

Pull down技術的基本原理是將一種蛋白質固定于某種基質上(如Sepharose),但細胞抽提液經過該基質時,可與該固定蛋白相互作用的配體蛋白被吸附,而沒有被吸附的“雜質”則隨洗脫液流出。被吸附的蛋白可以通過改變洗脫液或洗脫條件而回收下來。通過pull down技術可以確定已知的蛋白與釣出蛋白或已純化的相關蛋白間的相互作用關系,從體外轉錄或翻譯體系中檢測出蛋白相互作用關系。

三、酵母單雜與酵母雙雜檢測服務

四、雙分子熒光互補檢測服務(BIFC)

五、亞細胞定位檢測服務 

六、luc

免疫共沉淀檢測服務()

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